Калибрирането на комплект за откриване на зоонотични заболявания е щателен и решаващ процес, който гарантира точността, надеждността и възпроизводимостта на резултатите от тестовете. Като доставчик на комплекти за откриване на зоонотични заболявания разбирам значението на калибрирането при поддържането на качеството на нашите продукти. В този блог ще ви преведа през стъпките и съображенията, участващи в калибрирането на комплект за откриване на зоотични заболявания.
Разбиране на основите на комплектите за откриване на зоонотични заболявания
Зоонотичните заболявания са заболявания, които могат да се предават между животни и хора. Комплектите за откриване са предназначени да идентифицират наличието на патогени, свързани с тези заболявания в различни проби, като кръв, урина или тъкан. Тези комплекти обикновено използват техники като полимеразна верижна реакция (PCR), ензимно -свързан имуносорбентен анализ (ELISA) или базирани на флуоресценция.
Точността на комплект за откриване е от съществено значение, тъй като неправилната диагноза може да има сериозни последици, включително разпространение на заболявания и неподходящо лечение. Калибрирането е процесът на регулиране и валидиране на комплекта, за да се гарантира, че той осигурява последователни и точни резултати.
Препарати преди калибриране
Преди да започнете процеса на калибриране, е от съществено значение да се съберат всички необходими материали и оборудване. Това включва референтни стандарти, които са проби с известни концентрации на целевия патоген. Тези стандарти се използват за създаване на калибровъчна крива, която е графично представяне на връзката между измерения сигнал (като интензивност или абсорбция на флуоресценция) и концентрацията на патогена.
Например, ако използваме комплект за откриване на флуоресценция - катоИзследване на комплект Mira Brucella Floorescence Kit Изследване Използвайте само, трябва да имаме референтни стандарти на бруцела с различни известни концентрации. Освен това се нуждаем от подходящ инструмент за измерване на сигнала, като четец на флуоресценция.
Също така е от решаващо значение да се гарантира, че работната среда е чиста и без замърсители. Всяко замърсяване може да повлияе на точността на калибрирането и последващите резултати от теста. Температурата и влажността на околната среда трябва да бъдат в определения диапазон, за да може комплектът да функционира оптимално.
Стъпка - чрез - процес на калибриране на стъпка
1. Подготовка на референтните стандарти
Първата стъпка в калибрирането е да се подготвят поредица от референтни стандарти с различни концентрации на целевия патоген. Тези стандарти трябва да обхващат очаквания диапазон от концентрации на патогени в реални световни проби. Например, ако комплектът за откриване е проектиран да открива Toxoplasma gondii, можем да използвамеMira toxoplasma gondii флуоресценция за откриване на комплект Изследване Използвайте самои подгответе референтни стандарти на Toxoplasma gondii при ниски, средни и високи концентрации.
Референтните стандарти трябва да бъдат подготвени внимателно, за да се гарантира тяхната точност. Това може да включва разреждане на запасен разтвор на патогена с помощта на подходящ разредител. Разредието трябва да е съвместим с комплекта за откриване и не трябва да пречи на процеса на откриване.
2. Изпълнение на пробите за калибриране
След като референтните стандарти са подготвени, те се преминават през комплекта за откриване според инструкциите на производителя. Това обикновено включва добавяне на пробите към съответните кладенци в микроплака, добавяне на необходимите реагенти и инкубиране на плочата за определен период.
По време на инкубацията реагентите в комплекта реагират с целевия патоген в пробите, произвеждайки измерим сигнал. За комплекти на базата на флуоресценция този сигнал обикновено е интензитет на флуоресценция. Инструментът, използван за измерване на сигнала, трябва да бъде правилно калибриран и поддържан, за да се осигурят точни показания.
3. Създаване на кривата на калибриране
След пускане на калибриращите проби, измерените сигнали са начертани спрямо известните концентрации на референтните стандарти. Това създава крива на калибриране, която обикновено е линейна или не -линейна връзка в зависимост от метода на откриване.
Калибрационната крива се използва за определяне на концентрацията на патогена в неизвестни проби. Чрез измерване на сигнала на неизвестна проба и сравняването му с кривата на калибриране, можем да оценим концентрацията на патогена в тази проба.
4. Оценка на калибрационната крива
След като е създадена калибриращата крива, е важно да се оцени неговото качество. Това включва оценка на линейността, точността и прецизността на кривата. Линейността на кривата може да бъде определена чрез изчисляване на коефициента на корелация (стойност на R²). Висока стойност на R² (близо 1) показва добра линейна връзка между сигнала и концентрацията.
Точността на калибрационната крива може да бъде оценена чрез сравняване на измерените концентрации на референтните стандарти с техните известни концентрации. Прецизността на кривата може да бъде оценена чрез повторение на процеса на калибриране многократно и изчисляване на коефициента на вариация (CV) на измерените сигнали.
5. Регулиране на параметрите на комплекта (ако е необходимо)
Ако кривата на калибриране не отговаря на необходимите критерии за качество, може да се наложи да се направят корекции на параметрите на комплекта. Това може да включва регулиране на времето за реакция, концентрацията на реагентите или настройките на инструмента.
Например, ако флуоресцентният сигнал е твърде нисък, може да се наложи да увеличим инкубационното време или концентрацията на флуоресцентното багрило в комплекта. След извършване на корекциите процесът на калибриране трябва да се повтори, докато кривата на калибриране не отговаря на критериите за качество.
Контрол и валидиране на качеството
Калибрирането не е едно време. Важно е да се извършват редовни проверки за контрол на качеството, за да се гарантира, че комплектът продължава да дава точни резултати. Това включва работещи контролни проби с известни концентрации на патогена заедно с неизвестните проби във всеки тестов цикъл.
Резултатите от контролните проби трябва да попаднат в приемлив диапазон. Ако резултатите от контролните проби са извън приемливия диапазон, това може да показва проблем с комплекта, инструмента или процедурата за тестване. В такива случаи може да се наложи да се повтори процесът на калибриране или комплектът може да се наложи да бъде заменен.
Валидирането е друг важен аспект за осигуряване на точността на комплекта за откриване. Валидирането включва тестване на комплекта с голям брой реални проби от света и сравняване на резултатите със златен стандартен метод. Това помага да се потвърди, че комплектът може точно да открие патогена в различни видове проби и при различни условия.
Значение на калибрирането при откриване на зоонотични заболявания
Калибрирането е от решаващо значение при откриването на зоонотични заболявания по няколко причини. Първо, той гарантира точността на резултатите от теста, което е от съществено значение за вземане на информирани решения за диагностика и лечение на болести. Резултатите от неточните тестове могат да доведат до неправилна диагноза, което може да доведе до забавено лечение, разпространение на заболяването и ненужна употреба на антибиотици или други лекарства.
Второ, калибрирането помага да се поддържа възпроизводимостта на резултатите от теста. Това означава, че различните потребители на комплекта в различни лаборатории трябва да получат подобни резултати при тестване на едни и същи проби. Възпроизводимостта е важна за сравняване на данни в различни проучвания и за осигуряване на надеждността на комплекта в реални приложения.
И накрая, калибрирането се изисква от регулаторните агенции, за да се гарантира качеството и безопасността на медицинските изделия, включително комплекти за откриване на зоотични заболявания. Спазването на регулаторните изисквания е от съществено значение за приемането и използването на комплекта в клинични и изследователски условия.
Заключение
Калибрирането на комплект за откриване на зоонотични заболявания е сложен, но съществен процес, който гарантира точността, надеждността и възпроизводимостта на резултатите от тестовете. Като доставчик на комплекти за откриване на зоонотични заболявания, ние се ангажираме да предоставяме висококачествени продукти, които са правилно калибрирани и валидирани.
Ако се интересувате от закупуване на нашите комплекти за откриване на зоонотични заболявания или имате въпроси относно калибрирането или нашите продукти, моля, не се колебайте да се свържете с нас за повече информация и да започнете дискусия за обществени поръчки.
ЛИТЕРАТУРА
- Kutz, SJ, Dewey, CE, & Jenkins, EJ (2012). Зонози: инфекциозни заболявания, прехвърлящи се от животни на хора. Уайли - Блеквел.
- Peiris, JSM, Guan, Y., & Markwell, D. (2007). Грипски грип. The Lancet, 370 (9587), 1615 - 1626.
- Центрове за контрол и превенция на заболяванията. (2023). Зоонозни заболявания. Извлечено от [уебсайт на CDC].